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新聞資訊
目前，抑郁癥已經(jīng)崛起為全球第二主要致命因素，引起了人們對(duì)抑郁癥及其動(dòng)物研究的廣泛關(guān)注。針對(duì)抑郁癥的動(dòng)物模型已有20多種建立方法，今天，主要跟大家分享小鼠抑郁行為模型，它是研究抑郁癥機(jī)制以及尋找新型治療方法的關(guān)鍵工具之一。
其中，懸尾實(shí)驗(yàn)作為小鼠抑郁行為模型的重要組成部分，成為科學(xué)家們深入了解抑郁癥病理生理學(xué)的窗口。這一實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯ㄟ^模擬小鼠在絕望狀態(tài)中的行為表現(xiàn)，為研究人員提供了獨(dú)特的視角，使他們能夠更全面地了解抑郁癥的發(fā)病機(jī)制。本文將深入探討懸尾實(shí)驗(yàn)的原理、方法以及在小鼠抑郁行為模型中的實(shí)驗(yàn)流程等，旨在為抑郁癥研究領(lǐng)域提供更深層次的理論和實(shí)踐指導(dǎo)。（文末有驚喜）
簡介
小鼠的懸尾懸掛試驗(yàn)（Tail Suspension Test，TST）最早是由Steru等人于1985年提出的，旨在評(píng)估小鼠的抑郁樣態(tài)。這個(gè)實(shí)驗(yàn)是基于對(duì)抗抑郁藥物的研究，通過觀察小鼠在一段時(shí)間內(nèi)無法逃脫的懸掛狀態(tài)來測量其情緒狀態(tài)。懸尾懸掛試驗(yàn)被廣泛應(yīng)用于研究抗抑郁藥物和理解小鼠抑郁癥狀的行為表現(xiàn)。
原理
該實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯ㄟ^將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尾部固定，使其頭部懸掛在空中，創(chuàng)造一種困境環(huán)境。在這個(gè)環(huán)境中，動(dòng)物為了擺脫困境而掙扎，然而，一旦努力無效，動(dòng)物進(jìn)入一種間斷性的不動(dòng)狀態(tài)，表現(xiàn)出“行為絕望”狀態(tài)。
實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)旨在提供一種無法逃避的壓迫環(huán)境，引導(dǎo)動(dòng)物在一段時(shí)間內(nèi)通過掙扎來試圖逃離，但最終無法成功。通過記錄動(dòng)物在這個(gè)過程中表現(xiàn)出的一系列參數(shù)，特別是那種典型的“不動(dòng)狀態(tài)”，我們能夠觀察到動(dòng)物呈現(xiàn)出類似于抑郁癥的“行為絕望狀態(tài)”。
這種模型對(duì)于抗抑郁藥物的初步篩選具有高度敏感性，而且其藥效與臨床實(shí)際的治療效果之間存在顯著的相關(guān)性。因此，懸尾實(shí)驗(yàn)被廣泛運(yùn)用于抗抑郁藥物的評(píng)價(jià)，為研究提供了可靠的初步數(shù)據(jù)。
研究應(yīng)用
懸尾懸掛試驗(yàn)常用于評(píng)估抗抑郁藥物的療效或研究與抑郁相關(guān)的神經(jīng)機(jī)制。當(dāng)小鼠接受抗抑郁藥物治療后，其停留在懸掛狀態(tài)的時(shí)間會(huì)減少，被認(rèn)為是情緒改善的表現(xiàn)。
實(shí)驗(yàn)材料
懸尾懸掛試驗(yàn)（Tail Suspension Test，TST）的實(shí)驗(yàn)設(shè)備構(gòu)成簡單而高效的工具，用于評(píng)估小鼠的抑郁樣態(tài)。懸掛架是一根垂直支架，一般由堅(jiān)固的金屬或塑料材料制成，旨在讓小鼠能夠在空中懸掛，并保持其尾巴自由懸掛。通過調(diào)整支架的高度，確保小鼠被懸掛在適當(dāng)?shù)奈恢?，使其無法接觸地面或其他支撐物。
夾子或夾持裝置則被用來穩(wěn)定小鼠的尾巴，以確保在懸掛狀態(tài)下小鼠無法逃脫。這些夾子通常設(shè)計(jì)輕便而可靠，以防止對(duì)小鼠造成不適或傷害。夾子的固定位置通常設(shè)置在小鼠尾巴的基部，以確保尾巴能夠安全地固定在懸掛架上。
整個(gè)裝置的設(shè)計(jì)目的在于觀察小鼠在無法逃脫的懸掛狀態(tài)下的行為表現(xiàn)，從而評(píng)估其抑郁樣態(tài)。小鼠通常會(huì)表現(xiàn)出停止掙扎、蜷縮成一團(tuán)以及無動(dòng)于衷等行為，這種反應(yīng)被認(rèn)為類似于抑郁狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)者能夠記錄小鼠在這種狀態(tài)下停留的時(shí)間，從而量化其抑郁樣態(tài)的程度。這一實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的簡便性和高效性使其成為研究小鼠抑郁行為的重要工具。
實(shí)驗(yàn)流程
①實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和設(shè)備齊備，懸掛架、夾子等操作工具正常。
②小鼠選擇：挑選健康、年齡相近的小鼠，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。
③懸掛操作：為防止動(dòng)物彼此觀察或互相影響，中間用隔板隔開；動(dòng)物懸掛在隔間中間，寬度和深度足夠大，不能與墻壁接觸。
④行為觀察：記錄小鼠在懸掛狀態(tài)下的行為，特別關(guān)注抑郁癥狀。
⑤時(shí)間記錄：準(zhǔn)確記錄小鼠停留在懸掛狀態(tài)的時(shí)間。
⑥數(shù)據(jù)分析：使用統(tǒng)計(jì)方法比較不同組別小鼠在懸掛狀態(tài)下的行為，評(píng)估藥物療效。
參考數(shù)值：
對(duì)照組小鼠懸掛時(shí)間約為5-10分鐘。
抗抑郁藥物治療組小鼠懸掛時(shí)間顯著減少，可能降至2-5分鐘。
實(shí)驗(yàn)評(píng)估
懸尾懸掛試驗(yàn)（Tail Suspension Test，TST）是一項(xiàng)動(dòng)物行為學(xué)測試，被廣泛應(yīng)用于研究小鼠的抑郁樣態(tài)并評(píng)估抗抑郁藥物的效果，為科學(xué)研究提供了重要信息的窗口。
在抗抑郁藥物療效評(píng)估方面，懸尾懸掛試驗(yàn)為研究人員提供了一個(gè)觀察小鼠在懸掛狀態(tài)下行為反應(yīng)的手段，從而衡量小鼠的抑郁樣態(tài)。通過觀察藥物治療后小鼠停留時(shí)間的減少趨勢(shì)，可以推斷出該藥物對(duì)緩解抑郁癥狀具有一定的效果。
懸尾懸掛試驗(yàn)在研究與抑郁相關(guān)的神經(jīng)機(jī)制方面也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過對(duì)小鼠在懸掛狀態(tài)下行為的觀察和記錄，研究人員能夠深入了解抑郁癥狀的發(fā)生機(jī)制，以及與神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)回路等方面的關(guān)聯(lián)。這有助于深化對(duì)抑郁癥的理解，并為尋找新的治療方法提供重要線索。
此外，懸尾懸掛試驗(yàn)還廣泛應(yīng)用于研究與情緒調(diào)控相關(guān)的基因、蛋白質(zhì)和分子機(jī)制?？蒲腥藛T通過比較不同基因型小鼠在懸掛試驗(yàn)中的行為差異，揭示了與情緒調(diào)控相關(guān)的生物學(xué)基礎(chǔ)，為相關(guān)基因的功能研究提供了實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。這一綜合性的實(shí)驗(yàn)方法為揭示抑郁癥的多層次機(jī)制提供了有力的工具。
實(shí)驗(yàn)中常見問題及建議
1.適用動(dòng)物體重： TST懸尾實(shí)驗(yàn)不適宜使用較重的大鼠，因其只能通過尾巴支持體重，對(duì)其造成痛苦。同理，應(yīng)注意避免使用異常重的小鼠，例如用于模擬肥胖的小鼠，這時(shí)可尋找替代測試方法，如強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。
2.適應(yīng)環(huán)境時(shí)間： 動(dòng)物從居住環(huán)境帶入實(shí)驗(yàn)環(huán)境后，應(yīng)適應(yīng)一段時(shí)間，通常至少一個(gè)小時(shí)。
3.環(huán)境安靜性： 實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持安靜，避免突然大噪音，以免小鼠驚慌失措。
4.背景對(duì)比度： 使用軟件進(jìn)行分析時(shí)，選擇合適對(duì)比度的背景，白鼠使用黑色背景，黑鼠使用白色背景。
5.實(shí)驗(yàn)空間設(shè)計(jì)： 每只小鼠的實(shí)驗(yàn)空間建議為55cm高 * 15cm寬 * 11.5cm深左右，多通量實(shí)驗(yàn)時(shí)用隔板隔開，確保動(dòng)物懸掛在中央，寬度和深度足夠大，避免與墻壁接觸。
6.懸掛后鼻尖距離： 小鼠懸掛后，鼻尖與設(shè)備地板的距離建議在20~25 cm左右。
7.底部拖盤建議： 底部建議放置一個(gè)可拆卸的拖盤，以便收集糞便或尿液。
8.膠帶使用： 懸掛用的膠帶應(yīng)牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上，足夠堅(jiān)固以承受小鼠的重量。膠帶不應(yīng)過于粘滯，以免在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)給動(dòng)物帶來痛苦。
9.尾巴攀爬阻止器： 尾巴攀爬現(xiàn)象可通過在小鼠尾巴周圍放置塑料管阻止器防止，該簡單而有效的方法能夠防止小鼠攀爬自己的尾巴。
10.小動(dòng)作判定標(biāo)準(zhǔn)： 分析時(shí)，僅有前肢而沒有后肢介入的小動(dòng)作可判斷為不動(dòng)，而由慣性產(chǎn)生的擺動(dòng)可判斷為不動(dòng)。
11.實(shí)驗(yàn)結(jié)束膠帶處理： 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，輕輕將膠帶從尾巴上拉下，避免從尾巴上撕扯，減少動(dòng)物的不適感。
12.清潔程序：每次實(shí)驗(yàn)完成后，及時(shí)收集糞便和尿液，徹底擦拭懸掛盒，保持清潔。
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